蛋白質含量的測定方法
蛋白質含量的測定是我們判斷每一種食物是否含有高蛋白, 所以我們建議大家應該要對於蛋白質的檢測方法有一定的認識。 一般我們在生活中檢查蛋白質含量的方法是通過硫酸銅的方法, 也可以通過酚試劑的方法, 所以大家覺得哪種方法比較方便, 我們建議大家可以嘗試一下文章介紹的方法。
雙縮脲法(Biuret法) 靈敏度低 1~20mg 中速 20~30分鐘 多肽鍵+鹼性Cu2+紫色絡合物 硫酸銨;Tris緩衝液;某些氨基酸 用於快速測定, 但不太靈敏;不同蛋白質顯色相似 。
紫外吸收法 較為靈敏 50~100mg 快速 5~10分鐘 蛋白質中的酪氨酸和色氨酸殘基在280nm處的光吸收 各種嘌吟和嘧啶;
Folin-酚試劑法(Lowry法) 靈敏度高 ~5mg 慢速 40~60分鐘 雙縮脲反應;磷鉬酸-磷鎢酸試劑被Tyr和Phe還原 硫酸銨;Tris緩衝液;甘氨酸;各種硫醇 耗費時間長;操作要嚴格計時;顏色深淺隨不同蛋白質變化 。
考馬斯亮藍法(Bradford法) 靈敏度最高 1~5mg 快速5~15分鐘 考馬斯亮藍染料與蛋白質結合時,
SDS最好的方法;干擾物質少;顏色穩定; 顏色深淺隨不同蛋白質變化。
硫酸銅法:稱取0.2g硫酸銅, 6g硫酸鉀, 把0.5g粉碎好的大豆(不用測量水分的)用濾紙包好放入定氮瓶中中, 加20ml硫酸, (瓶口上放一個小漏斗, 防止蛋白跑掉)小火在電爐子上消化, 等沒有碳化顆粒, 並處於澄清狀態時, 拿下來涼一會。 再加過氧化氫直到把瓶頸上的蛋白沖洗乾淨為止, 再消化30分鐘。 拿下來, 等涼。
通過這篇文章對於蛋白質含量測定方法的介紹, 我們應該都知道如何在生活檢查蛋白質的含量, 所以我們建議大家應該要對於蛋白質的測定方法進行分析。 一般我們在生活中檢測蛋白質的方法是比較多的,