蛋白質濃度測定

試劑加完後，準確吸取20μl樣品溶液于酶標孔中，加入BCA試劑200μl，輕搖，於37℃保溫30-60min，冷卻至室溫後，以空白為對照，在酶標儀上590nm處比色，以牛血清白蛋白含量為橫坐標，以吸光值為縱坐標，繪製標準曲線。以標準曲線空白為對照，根據樣品的吸光值從標準曲線上查出樣品的蛋白質含量。

二價銅離子在鹼性的條件下，可以被蛋白質還原成一價銅離子，一價銅離子和獨特的（含有BCA）相互作用產生敏感的顏色反應。兩分子的BCA螯合一個銅離子，形成紫色的反應複合物。該水溶性的複合物在562nm處顯示強烈的吸光性，吸光度和蛋白濃度在廣泛範圍內有良好的線性關係，因此根據吸光值可以推算出蛋白濃度。