抗核抗體陽性

抗核抗體（antinuclear antibody，ANA）又稱抗核酸抗原抗體，是一組將自身真核細胞的各種成分去氧核糖核蛋白（DNP）、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等作為靶抗原的自身抗體的總稱，能與所有動物的細胞核發生反應，主要存在於血清中，也可存在于胸水、關節滑膜液和尿液中。抗核抗體在多種自身免疫病中均呈不同程度的陽性率，如系統性紅斑狼瘡（SLE，95%~100%）、類風濕性關節炎（RA，10%~20%）、混合性結締組織病（MCTD，80%~100%）、乾燥綜合症（SS,10%~40%）、全身性硬皮病（85%~90%）、狼瘡性肝炎（95%~100%）、原發性膽汁性肝硬化（95%~100%）等，但經皮質激素治療後，陽性率可降低。抗核抗體在類風濕病人中約有20%～50%IgG型ANA呈陽性，小兒類風濕ANA的陽性率約19%～35%，抗核抗體陽性伴發虹膜睫狀體炎者陽性率高（50%~90%），故ANA陽性預示類風濕有發生慢性睫狀體炎的可能。已發現75%類風濕病人有多形核白細胞的特異性ANA或抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）可使白細胞核受到破壞。抗核抗體是一組對細胞核內的DNA，RNA，蛋白或這些物質的分子複合物的自身抗體。按其核內各個分子的性能不同可將各ANA區分開來，如(一)抗DNA抗體，（二）抗組蛋白抗體，（三）抗非組蛋白抗體，（四）抗核仁抗體等。每一大類又因不同抗原特性而再分為許多種類。因此ANA在廣義上是一組各有不同臨床意義的自身抗體，更確切的名稱應為抗核抗體譜。ANA 主要存在於IgG，也見於IgM、IgA，甚至LgD及LgE中。抗核抗體陽性常見的核免疫螢光杭核抗體試驗有以下幾種圖形：（1）均質型：核質染色均勻一致，這種染色型常與抗組蛋白和抗DNA抗體有關；抗核抗體陽性（2）斑點型：核質染色呈斑點狀，抗可提取性核抗原（ENA）抗體常呈這種染色型；（3）周邊型：螢光染色圍繞在核膜周圍，它與抗DNA抗體有關；（4）核仁型：僅有核仁染色，具有抗4-6sRNA抗體呈現這種染色型；（5）著絲點型：在體外培養的細胞株（喉癌細胞）在核分裂相期時，可見到螢光染色的著絲點排列成特殊圖型，而在鼠肝做底物中看不到此類圖型，而被遺漏。

抗體分類編輯抗核抗體的分類，由於核抗原不同，有多種不同的ANA 。抗DNA抗體抗DNA抗體有抗雙鏈DNA（ds DNA）和抗單鏈(ss DNA)抗體之分。抗ds DNA抗體與SLE的關係密切，且隨疾病的活動度而升降，病情好轉者其滴度多下降甚或轉陰。抗ss DNA抗體則與抗ds DNA不同，可在多種疾病出現，包括一些非自身免疫性疾病，如細菌和病毒感染。故在臨床上無實用價值。而抗ds DNA抗體被認為是紅斑狼瘡（SLE）所特有。抗DNA的自身抗體在SLE發病中起一定作用。在一些SLE患者，DNA大分子存在於迴圈中或粘附於多種器官的微血管結構，這些迴圈或器官原位抗原型DNA均可與迴圈自身抗體發生反應，形成免疫複合物，啟動炎症系統，在一些器官如腎臟，肺和腦組織引起免疫複合物介導的疾病，導致組織損傷。抗可提取的核抗原（extractable nuclear antigen.ENA）抗體 此抗體原經鹽水或磷酸緩衝液處理，易從胞核中提取出來，且不含DNA。應用免疫螢光技術，抗ENA抗體型染色多呈斑點型。此類抗原分為九種，故產生九種相應抗體。（1）抗核糖核蛋白抗體(antiribonucleoprotein；抗RNP抗體)：抗原來源與SM相同。它對去氧核糖核酸酶不敏感，但對核糖核酸酶，胰酶敏感。1972年把它作為診斷混合性結締組織病（MCTD）的重要血清學依據。但以後發現本抗體可在多種風濕性疾病出現，不具備對某個病的特異性，但有助於鑒別結締組織病和非結締組織病。抗核RNP抗體見於近32%的SLE患者，幾乎見於所有MCTD患者。（2）抗SM抗體：SM系一患者Smith的簡稱。1966年Tan&Kunkel首先在患者Smith體中發現。抗原來源於小牛，兔胸腺，人脾等組織的一種酸性糖蛋白。抗SM抗體可見於1/3或以上的SLE患者，不出現於其他疾病中，對SLE診斷有特異性，成為很有價值的SLE診斷標誌，但無此抗體不能排除診斷。（3）抗SS-A抗體：系在發現Sjogren氏綜合征（SS）的＂A＂抗原後而命名，主要見於SS。本抗原可以從人、牛、豬脾中提取。它除存在核內外，也存在於細胞漿內。對胰酶敏感，對核糖核酸酶抵抗，能耐熱（56度）。（4）抗Ha抗體：抗Ha抗體可與小牛胸腺可溶性核提取物(以及小牛和鼠的肝提取物)起反應。見於SS患者,亦稱之為SS-B抗體.應用沉澱素反應，補體結合以及螢光技術檢測。多數人認為13%SLE及33%SS患者有抗Ha沉澱性抗體。（5）抗PM-1抗體：系多發性肌炎的特異性抗體。抗原系小牛胸腺核提取物，抗核抗體陽性有人暫稱之為PM-1。最初有人應用補體結合抑制試驗，確定該抗體特性，在皮肌類患者中發現PM-1抗體。有人測定在多發性肌類患者陽性率13.6%，皮肌類（DM）20%，系統性硬化並肌炎25%，SLE並肌炎偶有陽性，在其他疾病和正常人均陰性。說明本抗體對肌炎診斷有一定特異性。（6）抗MA1抗體：為發現抗核酸蛋白抗原的抗體，稱之為抗MA1抗體。該抗體只出現於某些嚴重的SLE患者中。檢測方法編輯由於ANA的複雜性及多樣性，故測定方法繁多。ANA常用的方法有免疫螢光法、放射免疫法、ELISA、免疫雙擴散、對流免疫電泳及免疫印跡技術等。1．免疫螢光法檢測血清總ANA最常用的方法是螢光免疫組化法。多用小鼠肝切片或印片作為細胞核基質，結果比較穩定可靠，在螢光顯微鏡下見到的細胞核有螢光著色為陽性反應。如將患者血清先進行不同比例的稀釋，可以做大致的定量試驗，在1:80稀釋仍然雖陽性時，對SLE的診斷有較大的參考價值。在油鏡下觀察結果，可以將ANA陽性的螢光現象分成4種主要的螢光核型，核型的確定對臨床診斷有進一步的參考價值。①周邊型表示抗DNA抗體存在；②均質型表示有抗DNP抗體；③斑點（顆粒）型多為抗ENA抗體；④核仁型多為抗核小體抗體。SLE患者常出現周邊型、勻質型或混合型，斑點型多見於混合結締組織病，而硬皮病多為核仁型；周邊型對SLE有較高的特異性。有人用錐蟲或血鞭毛蟲（例如綠蠅短膜蟲試驗）作基質測定抗dsDNA抗體，因為這些血寄生蟲的動基體內含大量的純dsNDA，無其他抗原干擾；在陽性結果時，可見鞭毛一端的動基體顯示清晰的螢光。因此該試驗用於測定抗dsDNA抗體具有特異性強和敏感性高的優點。另外，短膜蟲對人畜無害，可以人工養殖，來源方便，值得推廣。2．放射免疫法常用檢測抗DNA抗體，有Farr法及過濾法。①Farr法的原理為用同位素標記DNA，被標記的DNA和被檢血清的抗DNA抗體結合，經50%硫酸銨飽和液沉澱，然後比較沉澱物和上清液中的放射活性，從而得出DNA結合活性，一般結合率大於20%為陽性。②過濾法是在分離結合物時用纖維素酯薄膜濾器（孔徑為0.45μm）進行過濾，游離的DNA被濾去而與抗體結合的複合物被阻留在濾膜上。3．ELISA臨床上主要是應用間接ELISA檢測抗dsDNA抗體，其重複性及敏感性均較對流免疫電泳及雙擴散為高。已有試劑盒供應。4．免疫印跡（immunoblotting）先將混合抗原作凝膠電泳，分離開不同的區帶，然將這些帶轉印到硝酸纖維素膜上，最後用酸標抗體或放射性同位素標記抗體進行檢測和分析。由於該試驗不需純化的單個抗原，可在同一固相上作多項分析檢測，靈敏度高，特異性強。故已廣泛用於自身免疫病患者血清中多種自身抗體的檢測，如檢測抗Sm抗體、抗RNP抗體、抗SS-A抗體及SS-B抗體等。