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【BLO】
【歸檔】 14年05月26日
蛋白質免疫印跡技術是什麼
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免疫印跡是利用聚丙烯醯胺凝膠電泳來檢測樣品或提取物中某種特定蛋白的方法。聚丙烯醯胺凝膠緊貼著膜放置,在電流的作用下蛋白質從凝膠遷移到膜上並且被固定,常用的膜是硝酸纖維素或PVDF(聚偏乙烯氟化物)。膜是凝膠蛋白質的複製品,然後可以與抗體結合後進行染色。
免疫印跡又稱Western印跡(Western blot),與DNA的Southern印跡技術相對應,兩種技術均把電泳分離的組分從凝膠轉移至一種固相載體(通常為NC膜),然後用探針檢測特異性組分。不同的是,Western blot所檢測的是抗原類蛋白質成分,所用的探針是抗體,它與附著於固相載體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。該技術結合了凝膠電泳分辨力高和固相免疫測定特異敏感等諸多優點,具有從複雜混合物中對特定抗原進行鑒別和定量檢測,以及從多克隆抗體中檢測出單克隆抗體的優越性。該技術的靈敏度能達到標準的固相放射免疫分析的水準而無需對靶蛋白進行放射性標記。