pcr檢測應用在哪些方面
分子生物學在目前醫學研究領域算是前沿科技, 而44pcr檢測技術是其中之一, 在臨床醫學應用比較廣泛。 44pcr檢測技術主要用於對基因序列的分析, 檢測腫瘤、癌細胞和遺傳病等發生過程。 它的特點是在短時間之內可以檢測到突變的基因, 對於複雜的基因組織也有跡可循, 而且易於和其它基因檢測手段結合使用, 所以在醫學研究應用領域受到廣泛應用。
PCR在在突變檢測基因的應用:
一、點突變的PCR直接檢出
(一)用PCR直接檢測缺失:
當基因內缺失時, 可用已知的該基因DNA序列在缺失片段的兩側設計一對引物, 然後進行PCR, 對其產物行瓊糖凝膠電泳, 溴乙錠染色, 紫外檢測儀下檢測有無特異 性的擴增產物, 即可非常容易的判斷待檢稱本中有無DNA片段的缺失。
1. 一對引物PCR檢測缺失如果一個基因的DNA序列已經清楚, 其缺失部位亦較為固定, 即可根據缺失發生區域的DNA序列在缺失片段的兩側合成一對合適的引物進行PCR,
2. 多對引物的多重PCR檢測缺失。
3. 用PCR技術進行雜合性丟失的檢測。
(二)單個堿量置換的PCR直接檢出
1. 直接檢測限制性內切酶切點的變化-PCR產物酶解分析 。
2. 3'特異PCR, 擴增阻滯突變系統及等位元特異PCR。
3. 3.PCR直接測序。
4. PCR-寡核苷酸探針斑點雜交(PCR-ASb)。
二、用PCR技術快速篩查突變基因
前邊所述及的方法均可直接檢出突變部位, 而其前提則是突變的性質和部位必須清楚,
(一)PCR-單鏈構象多態性
(二)變性梯度膠(DGGE), 恒定變性膠(CGGE)及溫度(TGGE)檢測基因突變。
總之, 以PCR技術為基礎建立的基因突變檢測技術有多種, 而且各有其優缺點, 但目前較為廣泛應用的為PCR-SSCP, PCR-ASO及PCR迴圈直接測序, 隨著新方法的不斷出現, 將會大大的促進基因突變的研究。