怎麼測定唾液澱粉酶的最適ph

唾液澱粉酶(pancreaticamylase)是由唾液腺分泌的一種水解酶， 而澱粉經唾液中澱粉酶的水解， 生成糊精和麥芽糖。 而知道唾液澱粉酶的最適ph對於自身有好處， 那麼唾液澱粉酶的最適ph是多少呢， 又應該怎麼測定唾液澱粉酶的最適ph?

在底物過量的條件下， 相同時間內， 在溫度、酶濃度相同的條件下， 接近最適 pH 的反應體系中消耗澱粉的量最大， 剩餘澱粉與過量碘液生成的顏色越淺， 吸光度越小， 利用分光光度計測出各管的吸光度後， 取處於升高與降低趨勢之間的較小吸光度範圍對應的 pH 值即為唾液澱粉酶的最適 pH。

一、 材料與方法 儀器：吸量管(5mL， 1mL) ， 試管， 試管架， 小燒杯， 722 型分光光度計， 恒溫箱， 吸耳球 試劑：0.01mol/L 碘液， 0.2mol/L 磷酸氫二鈉， 0.2mol/L 磷酸二氫鈉， 澱粉溶液， 唾 液， 蒸餾水

二、方法：相同時間內， 在溫度、酶濃度相同、pH 不同的條件下， 酶的活度不同， 水解的澱粉量不同， 剩餘的澱粉與過量碘液生成的顏色不同，

操作步驟：

1、唾液的獲取：蒸餾水漱口後在口中含蒸餾水， 適宜時間後將蒸餾水連同唾液一同放置於事先準備好的容器中即可， 在實驗過程中應注意酶的失活， 為了防止此現象發生應將此液體置於冰水中冷卻。

2、不同pH緩衝液配製：根據下表配置各個pH值的緩衝溶液各10ml

3、澱粉用量的確定(為了更好觀察顏色變化， 可以加入適量蒸餾水使總體積相同。 混勻， 觀察現象， 並選擇顏色變化適中一支， 記錄其用量。 )

4、酶液稀釋倍數確定(為了更好觀察顏色變化， 可以加入適量蒸餾水使總體積相同， 混勻， 觀察現象， 並選擇適中一支， 記錄其稀釋倍數。 )

5、最適pH確定(蒸餾水調零， 測定660nm處吸光度A，

從上述的實驗中或許可以得出6.8為曲線最低點對應的pH值， 即為唾液澱粉酶的最適pH值。 但是需要注意的是澱粉酶的測定結果受方法的影響較大， 怎麼測定唾液澱粉酶的最適ph?不同方法參考值亦有所不同， 臨床所用方法也較多， 因此必須瞭解所用測定方法和其參考值， 才能作出正確的診斷。