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革蘭染色法的步驟是什麼

很多人對革蘭染色法都不瞭解是怎麼回事, 這是一種在細胞學很常使用的一種鑒別染色方法, 是一種複染髮, 在一八八四年一個丹麥醫生發明的染色方法, 分為四個步驟, 初染、媒染、脫色、複染等等。 大多數人對於革蘭染色法的步驟不瞭解, 下面讓小編給大家介紹。 革蘭染色法的步驟。

第一, 革蘭染色法的步驟是什麼?操作步驟:塗片將培養的不同菌分別作塗片(注意塗片切不可過於濃厚), 乾燥、固定。 固定時通過火焰1一2次即可, 不可過熱, 以載玻片不燙手為宜。

.染色( 1 )初染加草酸鉸結晶紫一滴, 約一分鐘, 水洗。

( 2 )媒染滴加碘液沖去殘水, 並覆蓋約一分鐘, 水洗。

3 )脫色將載玻片上面的水甩淨, 並襯以白背景, 用95 %酒精滴洗至流出酒精剛剛不出現紫色時為止, 約20一30秒鐘, 立即用水沖淨酒精。 ( 4 )複染用番紅液染1一2分鐘, 水洗。

( 5 )鏡檢乾燥後, 置油鏡觀察.革蘭氏陰性菌呈紅色,

革蘭氏陽性菌呈紫色。 以分散開的細菌的革蘭氏染色反應為准, 過於密集的細菌, 常常呈假陽性。

6 )同法在一載玻片上以大腸桿菌與枯草芽孢桿菌混合製片, 作革蘭氏染色對比。 革蘭氏染色的關鍵在於嚴格掌握酒精脫色程度, 如脫色過度, 則陽性菌可被誤染為陰性菌;而脫色不夠時, 陰性菌可被誤染為陽性菌。 此外, 菌齡也影響染色結果, 如陽性菌培養時間過長, 或已死亡及部分菌自行溶解了, 都常呈陰性反應。

第二, 革蘭氏染色反應是細菌分類和鑒定的重要性狀。 它是1884年由丹麥醫師Gr二創立的。 革蘭氏染色法(Gram stain )不僅能觀察到細菌的形態而且還可將所有細菌區分為兩大類:染色反應呈藍紫色的稱為革蘭氏陽性細菌, 用G+表示:染色反應呈紅色(複染顏色)的稱為革蘭氏陰性細菌, 用G一表示。 細菌對於革蘭氏染色的不同反應, 是由於它們細胞壁的成分和結構不同而造成的。

革蘭染色法的步驟, 革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由膚聚糖形成的網狀結構組成的, 在染色過程中, 當用乙醇處理時, 由於脫水而引起網狀結構中的孔徑變小, 通透性降低, 使結晶紫一碘複合物被保留在細胞內而不易脫色, 因此, 呈現藍紫色;革蘭氏陰性細菌的細胞壁中膚聚糖含量低, 而脂類物質含量高, 當用乙醇處理時, 脂類物質溶解,

細胞壁的通透性增加, 使結晶紫一碘複合物易被乙醇抽出而脫色, 然後又被染上了複染液(番紅)的顏色, 因此呈現紅色。