免疫共沉淀

免疫共沉淀是啥？免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原中間的專一性功效為基本的用以科學研究蛋白相互作用力的經典方式。 是明確二種蛋白在詳細體細胞內生理性相互作用力的合理方式。 那麼， 免疫共沉淀指的是什么？下邊對于這一問題來開展簡易的掌握和了解， 期待以下幾點對大伙兒有一定的協助！

當體細胞在非轉性標準下被裂化時， 詳細體細胞內存有的很多蛋白-蛋白間的相互作用力被保存了出來。 當用事先干固在argarose beads上的蛋白A的抗原免疫沉淀A蛋白質， 那麼與A蛋白質在身體融合的蛋白B也可以一起沉定出來。 再根據蛋白質轉性分離出來， 對B蛋白質開展檢驗， 從而證實二者間的相互作用力。

這類方式獲得的目地蛋白質是在體細胞內與興趣愛好蛋白質純天然融合的， 合乎身體具體情況， 獲得的結果真實度高。 這類方式常見于測量二種總體目標蛋白是不是在身體融合;也可用以明確一種特殊蛋白的新的功效搭擋。

優勢

(1)相互作用力的蛋白全是經漢語翻譯后裝飾的， 處在純天然情況;

(2)蛋白質的相互作用力是在當然情況下開展的， 能夠防止人為因素的影響;

(3)能夠分離出來獲得純天然情況的相互作用力蛋白質一氧化氮合酶。

缺陷

(1)可能檢驗不上低感染力和一瞬間的蛋白-蛋白相互作用力;

(2)二種蛋白的融合可能并不是立即融合， 而可能有第三者在中間起公路橋梁功效;

(3)務必在試驗前預測分析目地蛋白是什么， 以挑選最終檢驗的抗原， 因此， 若預測分析有誤， 試驗就無法得到結果， 方式自身具備冒險性。

(4)敏感度沒有親和力色譜分析高。

常見問題

(1) 保證溶膠凝膠法的蛋白質是由所添加的抗原沉定獲得的， 而并不是外源非特異蛋白質， 單克隆抗體的應用有利于防止環境污染的產生;

(2) 要保證抗原的特異性， 即不在表述抗原體的體細胞溶解物中加上抗原后不容易造成溶膠凝膠法;

(3) 明確蛋白質間的相互作用力是產生在體細胞中， 而不是因為體細胞的融解才產生的， 這需要開展蛋白的精準定位來明確。