磷酸化抗體檢測要注意什麼

磷酸化抗體，其實就是做磷酸化蛋白質的檢測，但是對於它的一個檢測問題，其實很多人都不太認識和瞭解，那麼下面就為大家具體介紹一下，磷酸化抗體一些檢測問題，只有我們對這些常識有一些科學的認識，那麼在生活當中出現這種情況的時候，才不會手足無措。

做磷酸化蛋白質的檢測，在裂解液中一定要加入磷酸酶抑制劑，防止其將磷酸化的蛋白質去磷酸化。關於磷酸化蛋白質的檢測我想說明一下幾點：

1、組織的製備一定要在冰上操作，而且速度要快。如果不是立刻配置樣品最好先放在液氮裡冷凍起來，哪怕兩個小時之後再製備樣品也有必要如此，因為磷酸化的蛋白質很容易分解。

2、組織裂解液一定要加入磷酸酶抑制劑。最好能夠多加一些蛋白酶的抑制劑。防止各種酶水解蛋白質。否則，不僅磷酸化的測不出，總蛋白質也很難測出來。

3、測磷酸化蛋白質，上樣量可以大一些，以載入量比較大的目標分子。

4、一抗和二抗的孵育時間都可相應延長，我曾經做過一抗孵育5小時（常溫），二抗2小時的試驗，結果很漂亮。

5、 推薦大家用發光劑顯影法，這樣靈明度要高一些。

6、壓片時間可以相應的延長。

以上就是關於磷酸化抗體的介紹，希望通過這些介紹，大家對這種常識，有科學的認識，在生活當中，其實我們更多的瞭解這些常識，也是為了幫助我們保證健康，避免一些不利影響的發生，每個人都應該注重這些認識。